簡要描述:
乙醛脫氫酶(ALDH)測試盒是醛脫氫酶的一種,廣泛存在于各種動物、植物和微生物體內(nèi)。主要作用是將乙醛氧化成乙酸,在酒精代謝中起主要作用。
更新時(shí)間:2024-09-02;廠商性質(zhì):經(jīng)銷商;覽量:947
商品詳情:
乙醛脫氫酶(ALDH)測試盒測定意義
乙醛脫氫酶 (EC 1.2.1.10)是醛脫氫酶的一種,廣泛存在于各種動物、植物和微生物體內(nèi)。主要作用是將乙醛氧化成乙酸,在酒精代謝中起主要作用。在人類和許多動物體內(nèi),線粒體乙醛脫氫酶能把對生物體有害的醇類轉(zhuǎn)化,所以在細(xì)胞解毒研究中乙醛脫氫酶受到高度關(guān)注;同時(shí),乙醛脫氫酶在分子生物學(xué)以及相關(guān)疾病的檢測方面有較廣泛的研究應(yīng)用。
貨號 | 規(guī)格 | 檢測方法 |
YSH3508 | 100管/96樣 | 微量法 |
YSH3508-1 | 50管/48樣 | 紫外分光光度法 |
測定原理
在輔酶Ⅰ存在的條件下,乙醛脫氫酶催化乙醛和NAD+轉(zhuǎn)化為乙酸和NADH,在340nm處的吸光值會增加,測定340nm處的吸光值變化,可計(jì)算得到乙醛脫氫酶的活性。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器
天平、離心機(jī)、紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、蒸餾水。
樣品中AA提?。?/span>
1.按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進(jìn)行室溫勻漿,然后轉(zhuǎn)移到1.5 mL EP 管中,蓋緊后(防止水分散失)置于沸水浴提取15 min;自來水冷卻后,8000g,,4℃離心10min,上清液置冰上待測。
2.細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL試劑一),超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g,4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
3.血清等液體:直接檢測。
計(jì)算公式如下:
1、血清(漿)LAP活力的計(jì)算:
單位的定義:每mL血清(漿)每分鐘生成1 nmol的對硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。
LAP(nmol/min/mL)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷V樣÷T=205.8×ΔA
2、組織、細(xì)菌或細(xì)胞中LAP活力的計(jì)算:
(1)按樣本蛋白濃度計(jì)算:
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。
LAP(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計(jì)算:
單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。
LAP(nmol/min /g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=205.8×ΔA÷W
(3)按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算:
單位的定義:每1萬個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。
LAP(nmol/min /104 cell)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(2000×V樣÷V樣總) ÷T=0.103×ΔA
V反總:反應(yīng)體系總體積,2×10-4 L;ε:對硝基苯胺摩爾消光系數(shù),9.72×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.05 mL;V樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應(yīng)時(shí)間,2 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;2000:細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù),2000萬。
注意事項(xiàng):
1. 試劑盒中試劑三、試劑四和標(biāo)準(zhǔn)品均需臨用前配制,且避光保存,配制好未使用完的4℃保存且3天內(nèi)使用完畢。
2. 為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,需先取1-2個(gè)樣做預(yù)實(shí)驗(yàn),如果測定的吸光值過高(高于2.5),用蒸餾水稀釋后再測定。
3. 與茚三酮反應(yīng)在570nm處無吸收峰,因此,570nm處測定結(jié)果不含這兩種氨基酸的量。
4.檢出限為100μmol/L。
甘露聚糖結(jié)合凝集su關(guān)聯(lián)絲氨2ELISA試劑盒 MASP2免費(fèi)代測試劑
甘丙肽受體4ELISA試劑盒 GALR4免費(fèi)代測試劑
甘丙肽受體3ELISA試劑盒 GALR3免費(fèi)代測試劑
甘丙肽受體2ELISA試劑盒 GALR2免費(fèi)代測試劑
甘丙肽受體1ELISA試劑盒 GALR1免費(fèi)代測試劑
甘胺-N-?;D(zhuǎn)移酶ELISA試劑盒 GLYAT免費(fèi)代測試劑
甘胺-N-甲基轉(zhuǎn)移酶ELISA試劑盒 GNMT免費(fèi)代測試劑
甘氨酰tRNA合成酶ELISA試劑盒 GARS免費(fèi)代測試劑
甘氨轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2ELISA試劑盒 GLYT2免費(fèi)代測試劑
甘氨轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1ELISA試劑盒 GLYT1免費(fèi)代測試劑
甘氨脒基轉(zhuǎn)移酶ELISA試劑盒 GATM免費(fèi)代測試劑
蓋膜蛋白βELISA試劑盒 TECTβ免費(fèi)代測試劑
蓋膜蛋白αELISA試劑盒 TECTα免費(fèi)代測試劑
鈣周期su結(jié)合蛋白ELISA試劑盒 CACYBP免費(fèi)代測試劑
鈣營養(yǎng)蛋白1ELISA試劑盒 CALN1免費(fèi)代測試劑
乙醛脫氫酶(ALDH)測試盒土壤氨基肽酶(S-LAP)測試盒/微量法100管/48樣
土壤錳過氧化物酶(S-Mnp)測試盒/分光光度法50管/24樣
土壤錳過氧化物酶(S-Mnp)測試盒/微量法100T/48S
土壤木質(zhì)su過氧化物酶(S-LiP)測試盒/分光光度法50管/24樣
土壤木質(zhì)su過氧化物酶(S-LiP)測試盒/微量法100T/48S
土壤脲酶(S-UE)測試盒/分光光度法50管/24樣
土壤脲酶(S-UE)測試盒/微量法100管/48樣
土壤脲酶(UE)測試盒/比色法50T/24樣
土壤漆酶(SL)測試盒/分光光度法50管/24樣